결핵균 검사
대한결핵협회의 검사사업은 1962년 중앙 결핵 검사소를 시작으로, 1964년에는 9개의 시도에 결핵 검사소를 운영했고,
60여 년이 흐른 현재는 12개 시도지부의 결핵균 검사실에서 국가결핵관리 지침에 따라 결핵균 검사를 합니다.
한때는 연간 40만 건에 달했으나, 대한결핵협회와 정부의 지속적인 노력으로 결핵환자의 수가 감소하면서 오늘날에는
연간 20만 건의 검사를 진행하고 있습니다.
결핵균 검사는 결핵균 감염뿐만 아니라, 환자별 적합한 치료 방법을 찾기 위한 과정입니다. 균종을 확인하고, 감염균의 약제내성을
파악하여 적합한 치료제를 처방합니다. 대한결핵협회는 전국 257개 보건소, 시도 병·의원 그리고 수탁 검사기관으로부터 검체를
의뢰받아 결핵 검사를 수행하고 있습니다.
·최근 5개년 결핵균 검사 현황
단위 : 건
최근 5개년 결핵균 검사 현황 표
| 도말검사 |
년도 |
배양검사 (고체, 액체) |
RT-PCR |
Xpert |
신속 (감수성) |
약제 (감수성) |
균종동정 |
NTM (감수성) |
| 2020 |
34,271 |
87,688 |
30,537 |
3,077 |
4,121 |
12,311 |
10,031 |
13,324 |
| 2021 |
23,310 |
73,584 |
25,408 |
2,041 |
4,388 |
11,412 |
10,700 |
14,396 |
| 2022 |
23,997 |
79,877 |
27,114 |
2,479 |
4,124 |
10,396 |
11,345 |
15,396 |
| 2023 |
127,443 |
338,449 |
66,166 |
4,247 |
4,444 |
10,2262 |
11,913 |
17,159 |
| 2024 |
112,108 |
235,764 |
59,737 |
3,672 |
4,266 |
9,521 |
14,089 |
18,111 |
결핵 검사
1. 결핵 의심 환자 및 치료 중인 결핵환자
결핵 의심 환자 및 치료 중인 결핵환자 결핵검사
| 대상 |
객담 및 기타 검체 |
| 목적 |
결핵 감염을 확인하는 검사 |
| 검사법 |
도말검사 |
배양검사 |
결핵균 Real Time PCR 검사 |
Xpert MTB/RIF 검사 |
| 내용 |
의뢰된 검체(객담 등)를 슬라이드에 도말하여 염색 한 후 항산균의 유무를 현미경으로 확인
집균도말, 형광염색법(Auramine O)
집균도말, Ziehl-Neelsen 염색법
|
고체 또는 액체배지에서 발육한 균을 감별하여 결핵균과 비결핵항산균을 확인
항산균 고체배양검사
항산균 액체배양검사
|
검체에서 DNA 추출 → PCR(핵산 증폭) 검사→ 결핵균 및 40여 종의 비결핵항산균 확인
실시간 중합효소 연쇄반응 (Real-time PCR)
|
검체에서 DNA 추출 → PCR(핵산 증폭) 검사→ 결핵균 확인 및 리팜피신 내성¹ 확인 |
| 검사 기간 |
1일 |
고체배양 8주, 액체배양 6주까지 배양 미발육: 음성 균발육: 균 감별 후 양성 통보 (1~2주 소요) |
2일 이내 |
2시간 |
| 대상 |
객담 및 기타 검체 |
| 목적 |
결핵 감염을 확인하는 검사 |
| 검사법 |
도말검사
의뢰된 검체(객담 등)를 슬라이드에 도말하여 염색 한 후 항산균의 유무를 현미경으로 확인
집균도말, 형광염색법(Auramine O)
집균도말, Ziehl-Neelsen 염색법
배양검사
고체 또는 액체배지에서 발육한 균을 감별하여 결핵균과 비결핵항산균을 확인
항산균 고체배양검사
항산균 액체배양검사
검사기간
고체 배양 최대 8주, 액체 배양 1~2주, 최대 6주
결핵균 Real Time PCR 검사
검체에서 DNA 추출 → PCR(핵산 증폭) 검사→ 결핵균 및 40여 종의 비결핵항산균 확인
중합효소 연쇄반응- 교잡반응법 (PCR-Hybridization)
Xpert MTB/RIF 검사
검체에서 DNA 추출→ PCR(핵산 증폭) 검사→ 결핵균 확인 및 리팜피신 내성¹ 확인
|
- 1) 내성: 균이 항생 물질 따위의 약제에 저항성을 갖는 현상
2. 결핵균이 확인된 경우
결핵균이 확인된 경우 결핵검사
| 대상 |
환자에게서 분리한 결핵균 |
| 목적 |
적합한 치료를 제공하기 위한 검사 |
| 검사법 |
신속 감수성²검사 |
결핵균 약제 감수성검사 |
결핵균 약제 감수성 최소억제농도 검사 |
| 내용 |
결핵균의 DNA에서 항결핵제(INH, RIF) 내성 유전자 유무를 확인
Line Probe Assay (LPA)방법
▪rpoB 유전자의 돌연변이
리팜피신 내성을 가짐
rpoB 유전자의 돌연변이-리팜피신 내성을 가짐을 확인하는 결과지1
| Gene |
|
Mutation |
| rpoB |
|
L511P |
| Q513L |
| D516V |
| D516Y |
| S522L |
| H526Y |
| H526D |
| S531L |
| L533P |
▪katG, inhA, ahpC 유전자의 돌연변이
아이소니아지드 내성을 가짐
katG, inhA, ahpC 유전자의 돌연변이가 아이소니아지드 내성을 가짐을 확인하는 결과지
| Gene |
|
Mutation |
| katG |
|
S315T |
| inhA |
|
C-15T |
| ahpC |
|
G-6A |
|
C-10A |
|
배양을 통해 결핵균의 항결핵제(16종)에 대한 감수성 또는 내성 여부를 확인
절대농도법 (Absolute concentration method)
▪항결핵제 리스트
항결핵제 종류
|
|
항결핵제 |
|
1차 항결핵제 |
|
Isoniazid(INH) |
| Rifampicin(RIF) |
| Streptomycin(SM) |
| Ethambutol(EMB) |
| Pyrazinamid(PZA) |
|
|
|
2차 항결핵제 |
|
Kanamycin(KM) |
| Rifabutin(RBT) |
| Amikacin(AMK) |
| Prothionamide(PTH) |
| Cycloserine(CS) |
| Ofloxacin(OFX) |
| Para-aminosalicylic acid(PAS) |
| Capreomycin(CPM) |
| Moxifloxacin(MOX) |
| Levofloxacin(LEV) |
|
|
|
항결핵 신약 |
|
Linezolid(LIN) |
| BDQ(Bedaquiline) |
| DLM(Delamanid) |
| CFZ(Clofazimine) |
|
|
|
RIF내성인 경우 항결핵 신약 (BDQ, DLM, CFZ) 미량액체희석법 검사 시행 |
|
|
|
|
결핵균 증식이 억제되는 항결핵제의 최소 농도를 확인
최소억제농도법 (Minimum Inhibitory Concentration)
약제 농도 표
|
|
항결핵제 |
|
약제농도 (mcg/ml) |
|
1차 항결핵제 |
|
Isoniazid(INH) |
|
0.03125 - 4.0 |
| Rifampicin(RIF) |
0.0625 - 8.0 |
| Ethambutol(EMB) |
0.25 -32.0 |
|
|
|
2차 항결핵제 |
|
Moxifloxacin(MOX) |
|
0.0625 - 8.0 |
| Levofloxacin(LEV) |
0.0625 - 8.0 |
| Cycloserine(CS) |
1.0 - 128.0 |
|
|
|
항결핵 신약 |
|
Linezolid(LIN) |
|
0.0625 - 8.0 |
| Bedaquiline(BDQ) |
0.03125 - 4.0 |
| Delamanid(DLM) |
0.00625 - 0.8 |
| Clofazimine(CFZ) |
0.0625 - 8.0 |
|
|
|
|
| 검사 기간 |
2일 이내 |
4주 ~ 8주 |
2주 ~ 4주 |
| 대상 |
환자에게서 분리한 결핵균 |
| 목적 |
적합한 치료를 제공하기 위한 검사 |
| 검사법 |
신속 감수성²검사
결핵균의 DNA에서 항결핵제 내성 유전자 유무를 확인
Line probe assay
▪rpoB 유전자의 돌연변이
리팜피신 내성을 가짐
rpoB 유전자의 돌연변이-리팜피신 내성을 가짐을 확인하는 결과지2
| Gene |
|
Mutation |
| rpoB |
|
L511P |
| Q513L |
| D516V |
| D516Y |
| S522L |
| H526Y |
| H526D |
| S531L |
| L533P |
▪katG, inhA, ahpC 유전자의 돌연변이
아이소니아지드 내성을 가짐
katG, inhA, ahpC 유전자의 돌연변이가 아이소니아지드 내성을 가짐을 확인하는 결과지
| Gene |
|
Mutation |
| katG |
|
S315T |
| inhA |
|
C-15T |
| ahpC |
|
G-6A |
|
C-10A |
결핵균 약제 감수성검사
배양을 통해 결핵균의 항결핵제(16종)에 대한 감수성 또는 내성 여부를 확인
절대농도법 (Absolute concentration method)
▪항결핵제 리스트
항결핵제 종류
|
|
항결핵제 |
|
1차 항결핵제 |
|
Isoniazid(INH) |
| Rifampicin(RIF) |
| Streptomycin(SM) |
| Ethambutol(EMB) |
|
|
|
2차 항결핵제 |
|
Kanamycin(KM) |
| Rifabutin(RBT) |
| Amikacin(AMK) |
| Prothionamide(PTH) |
| Cycloserine(CS) |
| Ofloxacin(OFX) |
| Para-aminosalicylic acid(PAS) |
| Capreomycin(CPM) |
| Moxifloxacin(MOX) |
| Levofloxacin(LEV) |
|
|
|
항결핵 신약 |
|
Linezolid(LIN) |
| BDQ(Bedaquiline) |
| DLM(Delamanid) |
| CFZ(Clofazimine) |
|
|
|
결핵균 약제 감수성 최소억제농도 검사
결핵균 증식이 억제되는 항결핵제의 최소 농도를 확인
최소억제농도법 (Minimum Inhibitory Concentration)
약제농도 안내
|
|
항결핵제 |
|
약제농도 (mog/ml) |
|
1차 항결핵제 |
|
Isoniazid(INH) |
|
0.03125 - 4.0 |
| Rifampicin(RIF) |
0.0625 - 8.0 |
| Ethambutol(EMB) |
0.25 -32.0 |
|
|
|
2차 항결핵제 |
|
Moxifloxacin(MOX) |
|
0.0625 - 8.0 |
| Levofloxacin(LEV) |
0.0625 - 8.0 |
| Cycloserine(CS) |
1.0 - 128.0 |
|
|
|
항결핵 신약 |
|
Linezolid(LIN) |
|
0.0625 - 8.0 |
| Bedaquiline(BDQ) |
0.03125 - 4.0 |
| Delamanid(DLM) |
0.00625 - 8.0 |
| Clofazimine(CFZ) |
0.0625 - 8.0 |
|
|
|
|
3. 비결핵항산균(NTM)이 확인된 경우
비결핵항산균은 결핵균이 아니지만, 면역력이 저하되면 기회감염을 일으킬 수 있습니다. 따라서 비결핵항산균의 균종을 확인하고,
약제 감수성검사를 시행합니다. 실험 결과에 따라 환자에게 적합한 치료를 제공합니다.
비결핵항산균(NTM)이 확인된 경우 결핵 검사
| 대상 |
환자에게서 분리한 비결핵항산균 |
| 목적 |
적합한 치료를 제공하기 위한 검사 |
| 검사법 |
NTM 균종 동정검사 |
NTM 약제 감수성검사 |
| 내용 |
배양을 통해 환자에게서 분리된 균(70여 종)에 대한 정확한 균종을 확인하는 검사
Line Probe Assay (LPA)방법
▪약 70여 종의 NTM균 검출 ▪그 중 23종의 NTM균의 종명 구분
|
비결핵항산균이 억제되는 항생제의 최소억제농도를 확인
액체배지미량희석법(Broth micro dilution method)
▪NTM 감염 치료에 사용하는 약제가 함유된 배지에 표준량의 균을 접종·배양 ▪균의 증식에 따라 약제에 대한 감수성 확인
|
| 검사 기간 |
2일 이내 |
2주 ~ 6주 |
| 대상 |
환자에게서 분리한 비결핵항산균 |
| 목적 |
적합한 치료를 제공하기 위한 검사 |
| 검사법 |
NTM 균종 동정검사
배양을 통해 환자에게서 분리된 균(70여 종)에 대한 정확한 균종을 확인하는 검사
PCR → Line Probe Assay (LPA)방법
▪약 70여 종의 NTM 검출 ▪그 중 23종의 NTM 균종 구분
NTM 균종 동정검사
비결핵항상균이 억제되는 항생제의 최소억제농도를 확인
액체배지미량희석법(Broth micro dilution method)
▪NTM감염 치료에 사용하는 약제가 함유된 배지에 표준량의 균을 접종·배양 ▪균의 증식에 따라 약제에 대한 감수성 확인
|